香蘭素(Vanillin),又名香草醛,為一種廣泛使用的可食用香料,可在香莢蘭的種子中找到,也可以人工合成,有濃烈奶香氣息。廣泛運(yùn)用在各種需要增加奶香氣息的調(diào)香食品中,如蛋糕、冷飲、巧克力、糖果;還可用于香皂、牙膏、香水、橡膠、塑料、醫(yī)藥品。
1、儀器與試劑
高效液相色譜儀;色譜柱250mm×4.6mm×5μm;超聲波水浴;電子分析天平(萬(wàn)分之一天平);組織搗碎機(jī);微孔濾膜:0.45μm,水相。
甲醇:色譜純。無(wú)水乙醇。磷酸溶液:0.01mol/L。
香蘭素標(biāo)準(zhǔn)工作液:稱取一定量的香蘭素用流動(dòng)相溶解配置成100mg/l的溶液,逐級(jí)稀釋到一定的濃度作為工作液。
2、測(cè)定原理
樣品加適量乙醇經(jīng)超聲波提取,經(jīng)高效液相色譜儀測(cè)定,外標(biāo)法定量。
3、色譜條件
色譜柱:色譜柱250mm×4.6mm×5μm;
流動(dòng)相:甲醇磷酸水溶液0.01mol/L;
流速:1mL/min;
進(jìn)樣量:20μL;
檢測(cè)波長(zhǎng):350nm。
4、試樣溶液的制備
樣品制備:固體樣品經(jīng)組織搗碎機(jī)搗碎混勻后備用;液體樣品搖勻后備用。
試樣處理:準(zhǔn)確稱取一定量的(精確至0.01g)試樣至500mL離心管中,加入20mL乙醇,混勻,經(jīng)超聲波浸提30min后,4000r/min離心5min,取上清液1ml,加入4ml的流動(dòng)相,混勻,經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后,待液相色譜測(cè)定。
5、結(jié)果分析
在添加0.25g/kg-5.0g/kg范圍內(nèi),回收率在89%-106之間,相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差小于5%。