一、原理
H2O2與硫酸鈦（或氯化鈦）生成過氧化物—鈦復(fù)合物黃色沉淀，可被H２SO4溶解后，在415nm波長下比色測定。在一定范圍內(nèi)，其顏色深淺與H2O2濃度呈線性關(guān)系。
二、儀器和用具
研缽；移液槍0.2ml和槍頭，5ml×1支；容量瓶10ml×7個(gè)，離心管5ml×8支；離心機(jī)；紫外可見分光光度計(jì)。
三、試劑
100μmol/L H2O2試劑；2mol/L硫酸；5%（W/V）硫酸鈦；丙酮；濃氨水。
30% H2O2指的是過氧化氫溶液的質(zhì)量比,其密度為1.1g/cm3,而過氧化氫的分子量是34.02,通過這些參數(shù)，我們可以推算出30%的過氧化氫的摩爾濃度為9.7mol/L.
四、方法
1.制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：取10ml離心管7支，順序編號，加入試劑。測定H2O2濃度標(biāo)準(zhǔn)曲線配置表。
待沉淀完全溶解后，將其小心轉(zhuǎn)入10ml容量瓶中，并用蒸餾水少量多次沖洗離心管，將洗滌液合并后定容至10ml刻度，415nm波長下比色。
2.樣品提取和測定
(1)稱取新鮮植物組織2~5g（視H2O2含量多少而定），按材料與提取劑1∶1的比例加入4℃下預(yù)冷的丙酮和少許石英砂研磨成勻漿后，轉(zhuǎn)入離心管3000 r/min下離心10min，棄去殘?jiān)�，上清液即為樣品提取液�?/p>
(2)用移液管吸取樣品提取液1ml，按表35-1加入5%硫酸鈦和濃氨水，待沉淀形成后3000rpm/min離心10min，棄去上清液。沉淀用丙酮反復(fù)洗滌3～5次，直到去除植物色素。(3)向洗滌后的沉淀中加入2mol硫酸5ml，待完全溶解后，與標(biāo)準(zhǔn)曲線同樣的方法定容并比色。
3.結(jié)果計(jì)算
植物組織中H2O2含量(μmol/g Fw)=
式中 C—標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得樣品中H2O2濃度（μmol）；
Vt—樣品提取液總體積（ml）；
V1—測定時(shí)用樣品提取液體積（ml）；
FW—植物組織鮮重（g）。
文章來源：中國化工儀器網(wǎng)
