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技術(shù)支持

液相色譜儀氨基柱使用注意事項有哪些

時間:2017-3-11 11:09:24      閱讀:4493


一、液相色譜儀氨基柱正相使用清洗與保存

1.1 收到柱子后,如果使用正相的方法,可直接用流動相平衡。用完后保存在異丙醇或正己烷中。

1.2 推薦先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速沖10倍柱體積,再根據(jù)流動相選用極性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速沖10倍柱體積,最后換成流動相。

1.3 正相使用時,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于還原糖的分析;流動相要徹底脫氣,并不得含有羰基化合物和過氧化物(質(zhì)量不好的乙醚、四氫呋喃含有少量)。

1.4任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶。

二、反相使用清洗與保存

2.1 由于新的LUNA 氨基柱保存在正己烷-乙腈(99:1)中,與反相流動相是不互溶的,因此如果使用反相的方法,必須用異丙醇沖洗儀器管路,除去管路中的乙腈,甲醇或水,再必須用至少20倍柱體積的異丙醇沖洗過渡(約3h,0.5mL/min),以除去正相保存溶液。過渡過程中注意因異丙醇粘度較大,會導(dǎo)致柱壓很高,適當調(diào)低流速即可。

再用至少10倍柱體積95%水-5%乙腈(或甲醇)沖洗(不含緩沖鹽的流動相可省去),最后用流動相平衡。

用完后洗柱時,必須先用95%水沖洗至少10倍柱體積,除去所用緩沖鹽(不含緩沖鹽的流動相可省去)。然后保存于乙腈/水(80:20)溶液中。長期不用的話,建議用異丙醇保存。

2.2 任何時候更換流動相時都要確保新流動相與柱子原保存液可互溶,并不會導(dǎo)致鹽結(jié)晶。

三、其它注意事項

3.1 反相條件下使用時,要特別注意控制pH值范圍,pH值越低越有發(fā)生水解的危險,流動相中水的比例越高當然也越有發(fā)生水解的危險。LUNA 氨基柱pH范圍為1.5-11.0,能耐100%水。

3.2 有一種情況是,當使用氨基柱進行酸性物質(zhì)的分析時,酸性物質(zhì)的存在意味著質(zhì)子的存在,可能會使略帶負電荷的氨基官能團質(zhì)子化,導(dǎo)致使用一段時間后對于某些類的分析物保留性質(zhì)有所改變或表現(xiàn)在柱效下降。建議:用5-10倍的柱體積的含0.5-1.0%NH3的乙腈-水(50:50)溶液沖洗該柱(沖洗后當然要再用不含堿的流動相洗去多余氨),之后再進行分析這類酸性分析物時建議在流動相中略微添加少許氨如0.1%。

(內(nèi)容來源化驗員之家)

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