一、原理
二氧化硫被四氯汞鈉吸收液吸收后，生成穩(wěn)定的絡(luò)合物，再與甲醛和鹽酸副玫瑰苯胺作用，并經(jīng)分子重排后，生成紫紅色的絡(luò)合物。顏色的深淺與二氧化硫的濃度成正比，可以比色測(cè)定。
二、儀器及試劑
儀器：分光光度計(jì)
（1）四氯汞鈉吸收液：稱(chēng)取氯化汞（HgCl2）27.2，氯化鈉11.7克，溶于水中并稀釋至1000毫升，放置過(guò)夜，過(guò)濾后使用。
（2）顯色劑：融解鹽酸福玫瑰苯胺100毫克于200毫升水中，加40毫升濃鹽酸，定容至500毫升，置于棕色瓶中。
（3）2％甲醛溶液：吸取37-40％甲醛5毫升于水中，并稀釋至100毫升。
（4）1％淀粉指示劑。
(5) 冰醋酸。
(6) 蛋白質(zhì)沉淀劑。
a)飽和硼砂溶液：溶解約25克硼砂于500毫升水中．
b)硫酸鋅溶液溶解150克硫酸鋅于500毫升水中。
(7)0.1N碘溶液。
(8)0.1N硫氏硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液。
(9) 二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液：稱(chēng)取0.5克亞硫酸氫鈉溶于200毫升四氯汞鈉吸收液中，放置過(guò)夜。上清液用定量濾紙過(guò)濾備用，按下法進(jìn)行標(biāo)定。
取10毫升亞硫酸氫鈉四氯汞鈉溶液于250毫升碘價(jià)瓶中，加水100毫升，加入0.1N碘溶液20毫升，冰醋酸5毫升，搖勻，用0.1N硫代硫酸鈉溶液滴定到淡黃色，加入1％淀粉指示劑5-6滴，繼續(xù)滴定至無(wú)色�？瞻自囼�(yàn)于250毫升碘價(jià)瓶中加A300毫升水，按上述步驟同樣操作。
SO2(毫克/毫升)＝(V1-V2)/10×N×32.03
V1；空白消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(m1)
V2：標(biāo)準(zhǔn)消耗硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的量(m1)
N：硫代硫酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液的當(dāng)量濃度
三、操作方法
(1) 樣品處理：稱(chēng)取經(jīng)搗碎蘑菇樣品20克，加入飽和硼砂溶液5毫升，硫酸鋅2毫升，攪拌均勻，移入100毫升容量瓶中，加水至刻度。過(guò)濾，濾液供測(cè)定用(濾液必須澄清，否則要重復(fù)過(guò)濾數(shù)次)。
(2) 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：吸取每毫升相當(dāng)于2微克的二氧化硫標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0毫升于25毫升比色管中，各加入2％甲醛溶液1毫升，顯色劑1毫升，另分別依次加入10、9、8、7、6、5毫升吸收液，混勻，靜置15分鐘，于分光光度計(jì)580毫微米波長(zhǎng)下測(cè)定
(3) 樣品分析：吸取濾液5毫升，加人吸收劑5毫升，2％甲醛溶液1毫升，顯色劑1毫升，混勻，靜置15分鐘，于分光光度計(jì)580毫微米波長(zhǎng)下測(cè)定光密度。根據(jù)測(cè)得的光密度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)查得相應(yīng)的二氧化硫的含量。
四、計(jì)算
S02：(毫克／公斤)＝C/W×1000
C；相當(dāng)于標(biāo)準(zhǔn)的量(毫克)。
W：測(cè)定時(shí)所取樣品溶液相當(dāng)于樣品的量(克)。
五、注意事項(xiàng)
(1)最適反應(yīng)為20-25℃，溫度低靈敏度低，故標(biāo)準(zhǔn)管與樣品管需在相同溫度下顯色。
(2)溫度為15-16℃，放置時(shí)間需延長(zhǎng)為25分鐘，顏色穩(wěn)定20分鐘。
(3)鹽酸副玫瑰苯胺中的鹽酸用量對(duì)顯色有影響，加人鹽酸量多，顯色淺，加入量少，顯色深，所以要按操作進(jìn)行。
(4) 甲醛濃度在0.15-0.25％時(shí)，顏色穩(wěn)定，故選擇0.2％甲醛溶液。
(5) 顏色較深的樣品，可用l0％活性炭脫色。
(6) 測(cè)定粉絲，粉條中的二氧化硫時(shí)，樣品要浸泡30分鐘。
(7) 樣品加入四氯汞鈉吸收液于100毫升容量瓶中，加水至刻度，搖勻。此溶液中的二氧化硫含量在24小時(shí)之內(nèi)很穩(wěn)定。
