液相色譜儀是藥物分析工作者最常使用的儀器之一，本文主要說(shuō)明液相色譜流動(dòng)相的配制與使用。
1、恒度洗脫
將水相與有機(jī)相混合后、使用混合型過(guò)濾膜抽濾，用一個(gè)管路(如A管)泵入儀器，這是基本原則。若使用兩個(gè)管路(一個(gè)純水相、一個(gè)純有機(jī)相)泵入儀器，極易造成水相中鹽和表面活性劑的少量析出。
剩余的流動(dòng)相可繼續(xù)使用，需密封后放置于陰涼處，待下次實(shí)驗(yàn)時(shí)與新配制的流動(dòng)相混合后使用。無(wú)需擔(dān)心發(fā)霉、無(wú)機(jī)鹽析出、揮發(fā)、比例不準(zhǔn)等問(wèn)題。
2、梯度洗脫
流動(dòng)相最為科學(xué)的配制方式如下：
（1）A相為高比例水相-低比例有機(jī)相，B相為低比例水相-高比例有機(jī)相(英國(guó)藥典如此規(guī)定)；
（2）A相為高比例水相-低比例有機(jī)相，B相為純有機(jī)相。
最不科學(xué)的為：A相為純水相、B相為純有機(jī)相，這會(huì)導(dǎo)致基線漂移嚴(yán)重，難以進(jìn)行穩(wěn)定的雜質(zhì)檢測(cè)。
梯度洗脫結(jié)束后，建議經(jīng)5min后回到初始狀態(tài)，再穩(wěn)定5min后開始下一測(cè)定。這10min的穩(wěn)定極為關(guān)鍵，切勿短時(shí)間內(nèi)回到初始狀態(tài)，會(huì)對(duì)儀器和色譜柱造成損害。一周內(nèi)，對(duì)梯度洗脫進(jìn)行連續(xù)試驗(yàn)，結(jié)果是：第一針與最后一針主成分保留時(shí)間相差均小于6s。
引申閱讀：水相中溶質(zhì)的溶解
水相中需溶解的無(wú)機(jī)鹽和表面活性劑等固體溶質(zhì)，建議采用加熱法，不建議采用振搖、超聲等方式。因?yàn)檎駬u、超聲有可能使得溶質(zhì)處于“臨界膠團(tuán)濃度”，其后一旦遇到某特殊情形(如遇有機(jī)溶劑、溫度劇降等)，極易析出結(jié)晶，損傷儀器和色譜柱，呈現(xiàn)泵頭處析出“鹽和白粉”的現(xiàn)象。
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