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技術(shù)支持

質(zhì)譜分析條件的選擇與操作介紹

時間:2017-5-15 10:13:47      閱讀:1843

質(zhì)譜儀種類很多,不同類型的質(zhì)譜儀的主要差別在于離子源。離子源的不同決定了對被測樣品的不同要求,同時所得到信息也不同。因此,在進行質(zhì)譜分析前,要根據(jù)樣品狀況和分析要求選擇合適的質(zhì)譜儀。

除了純化合物的結(jié)構(gòu)解析可使用直接進樣分析外,藥物分析目前均采用色譜一質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù),主要是:氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀和液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀。

一、氣相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀GC-MS分析條件的選擇

在GC-MS分析中,色譜的分離和質(zhì)譜數(shù)據(jù)的采集是同時進行的。為了使每個組分都得到分離和鑒定,必須選擇合適的色譜和質(zhì)譜分析條件。

色譜條件包括:色譜柱類型,固定液種類,汽化溫度,載氣流量,分流比,溫升程序等。質(zhì)譜條件包括電離電壓,電子電流,掃描速度,質(zhì)量范圍,溶劑去除時間等。這些都要根據(jù)樣品情況進行設(shè)定。

二、液相色譜一質(zhì)譜聯(lián)用儀LC-MS分析條件的選擇

LC分析條件的選擇要考慮兩個因素:流動相的組成和流速。

在LC和MS聯(lián)用的情況下,由于要考慮噴霧霧化和電離,因此,有些溶劑不適合于作流動相。不適合的溶劑和緩沖液包括無機酸、不揮發(fā)的鹽(如:磷酸鹽)和表面活性劑。不揮發(fā)性的鹽會在離子源內(nèi)析出結(jié)晶,而表面活性劑會抑制其它化合物電離。在LC-MS分析中常用的溶劑和緩沖液有水、甲醇、甲酸、乙酸、氫氧化銨和乙酸銨等。對于選定的溶劑體系,通過調(diào)整溶劑比例和流量以實現(xiàn)好的分離。值得注意的是對于LC分離的最佳流量,往往超過電噴霧允許的最佳流量,此時需要采取柱后分流,以達到好的霧化效果。

質(zhì)譜條件的選擇主要是為了改善霧化和電離狀況,提高靈敏度。調(diào)節(jié)霧化氣流量和干燥氣流量可以達到最佳霧化條件,改變噴嘴電壓和透鏡電壓等可以得到最佳靈敏度。對于多級質(zhì)譜儀,還要調(diào)節(jié)碰撞氣流量和碰撞電壓及多級質(zhì)譜的掃描條件。

在進行LC-MS分析時,樣品可以利用旋轉(zhuǎn)六通閥通過LC進樣,也可以利用注射泵直接進樣,樣品在電噴霧源或大氣壓化學(xué)電離源中被電離,經(jīng)質(zhì)譜掃描,由計算機可以采集到總離子色譜和質(zhì)譜。

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