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行業(yè)應(yīng)用

飼料中喹乙醇的測(cè)定方案

時(shí)間:2017-3-20 10:14:47      閱讀:1602

概述    

據(jù)央視315晚會(huì)曝光,有的養(yǎng)殖戶(hù)和廠(chǎng)家將的黃色粉末狀藥物(喹乙醇)喂食給了動(dòng)物。喹乙醇長(zhǎng)期使用,會(huì)蓄積在動(dòng)物體內(nèi),誘變細(xì)胞染色體畸形,此外還會(huì)造成耐藥性,給人類(lèi)身體健康帶來(lái)潛在危害。

喹乙醇又稱(chēng)喹酰胺醇,由于喹乙醇有中度至明顯的蓄積毒性,對(duì)大多數(shù)動(dòng)物有明顯的致畸作用,對(duì)人也有潛在的三致性,即致畸形,致突變,致癌。

因此喹乙醇在美國(guó)和歐盟都被禁止用作飼料添加劑�!吨袊�(guó)獸藥典》(2005版)也有明確規(guī)定,喹乙醇被禁止用于家禽及水產(chǎn)養(yǎng)殖。

本文主要介紹某飼料中喹乙醇的測(cè)定。

一、參考標(biāo)準(zhǔn)和實(shí)驗(yàn)原理 

1、參考標(biāo)準(zhǔn):GBT 8381.7-2009 飼料中喹乙醇的測(cè)定 高效液相色譜

2、原理:飼料試樣中的喹乙醇經(jīng)過(guò)甲醇水溶液提取, PLS固相萃取小柱凈化,液相色譜C18色譜柱分離,紫外檢測(cè)器分析。

二、儀器與試劑

全自動(dòng)高通量柱膜通用固相萃取系統(tǒng);二元高壓梯度高效液相色譜儀;恒溫振蕩器;高速離心機(jī)

甲醇(色譜純FISHER Chemical);鹽酸(分析純);超純水(實(shí)驗(yàn)室制備)。

三、實(shí)驗(yàn)過(guò)程

1、標(biāo)準(zhǔn)貯備液配置

用容量瓶準(zhǔn)確配置喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)貯備液為100ug/mL,選用甲醇定溶。

2、飼料樣品處理

(1)提取

取5g飼料樣品于具塞錐形瓶中,加入50mL5%甲醇水溶液,放入振蕩器,恒溫振蕩45min,將提取液導(dǎo)入離心管,3500r/min離心10min,取上清液過(guò)0.45um濾膜過(guò)濾,等待全自動(dòng)固相萃取儀凈化。

(2)凈化

SPE柱活化:臨用前將3mL甲醇和3mL超純水分別以3mL/min過(guò)柱,注意不要讓萃取柱填料干涸;

上樣:取5mL提取液上清液液過(guò)柱,流速不大于3mL/min;

淋洗:用3mL淋洗液淋洗小柱,3mL/min,氮?dú)獯蹈?0秒;

洗脫:用2mL40%甲醇水溶液以3mL/min洗脫并收集,氮?dú)獯蹈?0秒。

(3)樣品加標(biāo)處理

將提取樣品的上清液,加標(biāo)后樣品濃度10ug/mL,用來(lái)測(cè)定全自動(dòng)固相萃取系統(tǒng)加標(biāo)回收率。

四、實(shí)驗(yàn)分析

1、液相色譜條件

色譜柱:Labtech C18(250×4.6 mm,5 μm)

流動(dòng)相:甲醇   : 水=15 : 85

流速:1.0 mL/min

柱溫:30 ℃

檢測(cè)器:UV 260 nm

2、定量測(cè)定

    將10ug/mL喹乙醇標(biāo)準(zhǔn)樣品進(jìn)液相色譜分析,查看色譜圖,查看飼料樣品提取液空白液相色譜分析圖、飼料樣品提取液加標(biāo)濃度10ug/mL色譜圖。 

3、樣品加標(biāo)回收率結(jié)果

表1樣品加標(biāo)10ug/mL回收率


回收率,%

平均值,%

RSD,%

1

2

3

4

5

6

喹乙醇

93.1

95.3

92.2

94.1

96.3

90.9

93.7

2.1 

五、結(jié)論與討論

本方法使用全自動(dòng)高通量柱膜通用固相萃取系統(tǒng)凈化飼料中喹乙醇回收率在90.9%~96.3%,RSD為2.0%。

結(jié)果比較理想,驗(yàn)證樣品加標(biāo)濃度在10ug/mL回收率可靠,實(shí)驗(yàn)可行,避免人工操作繁瑣的問(wèn)題。

注:本文僅代表個(gè)例,不具有普適性,僅作為方法探討。

(內(nèi)容參考儀器信息網(wǎng))

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