亚洲偷窥白浆白乳无码,线上看黄片18禁,高清少妇毛多多毛片免费在线观看,久久人人妻人人爽人人爽,两个人

您好!歡迎光臨太原衡天力科貿(mào)有限公司!

留言系統(tǒng)
主題:
內(nèi)容:
    
 
當前位置:首頁 > 技術支持

技術支持

色譜圖出現(xiàn)雙峰怎么辦

時間:2016-11-26 10:14:22      閱讀:1682

高效液相色譜儀HPLC分析中,在色譜柱正常,樣品靈敏度足夠,分析方法合適,色譜峰在出峰時間較短的條件下(不包括梯度),峰型應對稱而尖銳。但是,在對樣品了解程度不夠,方法不妥,樣品處理方法及進樣方式不合理下,會出現(xiàn)各種意想不到的問題,本文主要說明色譜雙峰可能的原因及處理方法。 

色譜雙峰可能的原因有四種。

1、色譜柱

如果你分析樣品時發(fā)現(xiàn)每個色譜峰都雙峰出現(xiàn)(出峰越快,雙峰的可能性會減少),尤其采用單一純物質(zhì)時,可以肯定色譜柱出問題,柱頭受損或柱頭固定相變臟或流失。

如果進樣量少,原來色譜柱正常,色譜峰的形狀多為一大峰帶一小峰,不一定拖尾,這一般應是柱頭受堵,將色譜柱反過來接,用流動相沖洗或酸洗或其它溶劑,將堵在柱頭的殘留物沖掉,再反過來,一般情況下就行了。

當然不反沖,正沖有時也會正常的。如果峰拖尾,雙峰強弱相差不大,柱頭固定相變臟或流失可能性更大,這是可以將進樣那頭擰開,將微孔濾片超聲,柱頭刮去一部分填料,重新填上新填料擰緊,不過這種活,需要一定技術,同時不能老干那種事,否則用不了幾次,色譜柱就會應柱效很低而報廢。

2、溶劑極性及進樣量

許多HPLC分析者對此可能不以為然,一般的HPLC的書籍和文獻都不會提到這方面的內(nèi)容,而這確是雙峰產(chǎn)生的一個很重要的原因。目前HPLC分析多為反相色譜,流動相多為甲醇、乙腈、水,加各種添加劑以改善分離性能。

樣品一般用與流動相相溶的溶劑溶解。最佳的溶解方法是用流動相溶解,但是很多情況是不一致的。

當用溶劑極性強度大的試劑,如純甲醇、純乙腈,純乙醇,而分析體系中以水為主,樣品進樣量大,如定量管為20ul,此條件下完全可以肯定,單一的純物質(zhì)出雙峰,第二峰比第一峰�。看味疾惶粯樱�,且拖尾,保留時間會提前(相對進樣量少而言),將進樣量減少一半以上,峰型將變?yōu)檎�。這是樣品的溶劑與流動相極性相差太大,而流動相來不及將其稀釋達到平衡造成的。

上面提到進樣量造成雙峰的一個原因,另一個原因是,進樣量不一定大,但絕對量很大,色譜圖上的雙峰緊靠在一起,基本上齊高,不拖尾(如果出峰很快,也可能是色譜柱問題)。將樣品稀釋再進樣就可以了,這是由于進樣量過大,色譜柱過載造成的。

如果樣品溶劑與流動相不溶或互溶性不好,當樣品注入色譜分離體系中,會析出并接著再溶解的可能,這時相當于二次進樣,也非常容易產(chǎn)生雙峰。

3、樣品的特性及ph值

有些樣品由于其化學結(jié)構(gòu)的特點,存在互變異構(gòu)現(xiàn)象,而這種互變異構(gòu)體無法分開,而是以一個動態(tài)平衡存在。在色譜分析時,在一個特定的條件下,一種物質(zhì)將出現(xiàn)雙峰,雙峰靠的很近,基本齊高,不拖尾,條件稍一變化,尤其pH,雙峰現(xiàn)象將消失,如紅霉素等。

有的樣品紫外的色譜圖上看不到雙峰,但在LC-MS下,用質(zhì)譜檢測器,其質(zhì)譜的總離子流圖上較明顯,例如農(nóng)藥啶蟲瞇(吡蟲清)。

pH對峰形的影響在緩沖液流動相平衡過程中非常明顯,當連續(xù)進樣時,受pH的連續(xù)變化影響會經(jīng)常遇到這種雙峰的情況。另外,在樣品分析時,流動相的pH盡量遠離被分析物的等電點,否則也容易引起雙峰的產(chǎn)生。在用離子對試劑分析時,選擇不好條件也會容易引起雙峰的產(chǎn)生。

4、參數(shù) 

    記錄的參數(shù)一般都內(nèi)定的,不必修改,但GC和HPLC的參數(shù)是不完全一致的,例如C-R3A數(shù)據(jù)記錄儀上的一般記錄時間間隔GC為2ms,HPLC為5ms,如果記錄間隔時間縮短,一個峰將變?yōu)槎䝼峰或更多。

    還有一種情況是,參比波長設置錯誤,例如設置分析波長254nm,參比波長400nm,這個對于大多數(shù)化合物可能沒影響。但是如果被測化合物,在400nm處也有強的紫外吸收,比254nm更高。這樣其出峰時,由于背景的抵扣作用,本來一個峰會變成對稱的二個峰,而且如果將二峰之間的峰谷反轉(zhuǎn)180度,恰好是一個完整的峰。這時要將參比波長設置更大,或者取消。

更多

榮譽證書

淘寶店入口 | 公司介紹 | 新聞動態(tài) | 島津天平 | 儀電雷磁 | 儀電分析 | 儀電物光 | 上海一恒 | 上海昕瑞 | 舜宇恒平 | 上海菁華 | 產(chǎn)品報價

版權所有:太原衡天力科貿(mào)有限公司 聯(lián)系人:蔡經(jīng)理 聯(lián)系電話:13513512998 固話:0351-4293088 0351-4216957
詳細地址:太原市迎澤區(qū)雙塔東街中正悅灣5-1014號 晉ICP備08003424號-1

百度統(tǒng)計