一、色譜柱的保存
色譜柱用進(jìn)樣墊將色譜柱的兩端封住，并放回原包裝。在安裝時(shí)要將色譜柱的兩端截去一部分，以確保沒有進(jìn)樣墊的碎屑?xì)埩粲谥小?/p>
二、色譜柱的重新安裝
色譜柱重新安裝時(shí),密封要注意：
a.安裝位置(尺寸)要重現(xiàn)，否則引起峰靈敏度變化；
b.安裝時(shí)防止碎渣進(jìn)入色譜柱引起峰形拖尾；
c.不需要擰得太緊；
e.使用清潔的密封墊，避免用手接觸密封墊，以防手上的油脂污染；
f.密封墊安裝前，要仔細(xì)檢查有無損傷，以防安裝后，有問題時(shí)不易拆除；
g.對(duì)那些不宜重復(fù)使用，如石墨密封墊，重新安裝柱時(shí)要注意及時(shí)更換。
三、色譜柱的更換
分離度是考察一根色譜柱分離具體樣品的好壞程度的指標(biāo)。色譜的核心任務(wù)就是為了使每個(gè)峰完成分離，得到有合理峰寬的色譜峰，以便獲得較低的檢測(cè)限。然而，塔板數(shù)對(duì)分離度的影響僅僅是平方根的關(guān)系，當(dāng)一根色譜柱的塔板數(shù)下降50%，分離度僅下降7%。
其實(shí)，大多數(shù)用戶僅僅使用色譜柱塔板數(shù)的一小部分。例如，對(duì)一支新的150mm×4.6mm，5mm粒徑的色譜柱來講，廠家測(cè)試報(bào)告上的塔板數(shù)為14，000。使用下面的公式可以估算一支色譜柱的塔板數(shù)：
N=3000L/Dp ，其中
L是色譜柱的柱長，以厘米為單位；Dp是填料的粒徑，以微米為單位。
一支150mm×4.6mm，5mm粒徑的色譜柱的柱效大約為9000，比廠家測(cè)試數(shù)據(jù)低30%。在實(shí)際的工作中，大多數(shù)色譜方法僅僅需要這些塔板數(shù)的一半，可見，色譜柱的塔板數(shù)不是分離中最重要的參數(shù)。
較好的方法是使用壓力、分離度和峰形的混合指標(biāo)來考察一根色譜柱的狀態(tài)。
壓力的測(cè)量是最容易的，通常我們確定的色譜方法要滿足以下的要求：用新柱子時(shí)柱壓不高于2500psi，在任何情況下壓力都不超過3000psi。有統(tǒng)計(jì)表明，超過60%的色譜柱損壞是由于壓力過高的原因。
分離度是考察色譜柱的一個(gè)非常重要的指標(biāo)，只要兩個(gè)組分可以獲得基線分離，對(duì)該分析物的定量就不會(huì)有什么問題。對(duì)于高斯峰來講，1.5的分離度即可得到基線分離；若分離度在1.7至2.0之間則更好。若峰拖尾嚴(yán)重則需要更高的分離度。使用分離度作為色譜柱的評(píng)價(jià)指標(biāo)的好處在于我們可以直觀地看到相鄰的峰的分離情況。
另外一個(gè)考察色譜柱質(zhì)量的標(biāo)準(zhǔn)是峰形拖尾情況，廠家測(cè)試報(bào)告的峰形都非常漂亮，但這并不代表該色譜柱分析實(shí)際樣品的情況。
通常，在開發(fā)分析方法的過程中，一般會(huì)試驗(yàn)幾根色譜柱，分析足夠多的實(shí)際樣品，就知道當(dāng)分離變差時(shí)是什么樣的情況。在開始時(shí)可使用一個(gè)寬的范圍；如果在開始時(shí)緊縮系統(tǒng)適用性要求，在方法認(rèn)證后再放寬這個(gè)要求，是很困難的。在分析實(shí)際樣品之前進(jìn)行系統(tǒng)適用性考察，以確保該色譜方法滿足分析者可以接受的標(biāo)準(zhǔn)。
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