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技術(shù)支持

722型分光光度計的使用方法

時間:2015-10-19 9:54:15      閱讀:1615

722型分光光度計的使用方法如下:

一、測量原理 

分光光度法測量的理論依據(jù)是伯郎比耳定律:當容液中的物質(zhì)在光的照射和激發(fā)下,產(chǎn)生了對光吸收的效應(yīng)。但物質(zhì)對光的吸收是有選擇性的,各種不同的物質(zhì)都有其各自的吸收光譜。所以根據(jù)定律當一束單色光通過一定濃度范圍的稀有色溶液時,溶液對光的吸收程度A與溶液的濃度cg/l)或液層厚度b(cm)成正比。其定律表達式A=abc 
a是比例系數(shù))。當c的單位為mol/l時,比例系數(shù)用ε表示,則A=εbc稱為摩爾吸光系數(shù)。其單位為L•mol-1•cm-1它是有色物質(zhì)在一定波長下的特征常數(shù)。 
T(透光率)=I/I0 A(吸光度)= -lgT  A=K•C•L(比色皿的厚度) 
測定時,入射光I, 吸光系數(shù)和溶液的光徑長度不變時,透過光是根據(jù)溶液的濃度而變化的,即“K”為常數(shù)。比色皿厚度一定,“L”“I0”也一定。只要測出A即可算出“C”。  
二、 722型分光光度計的使用 
1、將靈敏度旋鈕調(diào)至“1”檔(信號放大倍率最小)。 
2、開啟電源,指示燈亮 ,選擇開關(guān)置于“T”,波長調(diào)至到測試用波長。儀器預(yù)熱20分鐘。 
3、打開試樣室(光門自動關(guān)閉),調(diào)節(jié)透光率零點旋鈕,使數(shù)字顯示為000.0。(調(diào)節(jié)100%T旋鈕),蓋上試樣室蓋,將比色皿 
架處于蒸餾水校正位置,使光電管受光,調(diào)節(jié)透光率100%旋鈕使數(shù)字顯示100.0。如顯示不到100.0,則可適當增加微電流放大的倍數(shù)。(增加靈敏度 
的檔數(shù)同時應(yīng)重復(fù)(3)調(diào)節(jié)儀器透光率的“0”位)但盡量使倍率置于低檔使用。這樣儀器會有更高的穩(wěn)定性。 
4、預(yù)熱后,按(3)連續(xù)幾次調(diào)整透光率的“0”位和“100%”的位置,待穩(wěn)定后儀器可進行測定工作。 
三、 吸光度“A”的測量 
將選擇開關(guān)置于。調(diào)節(jié)吸光度調(diào)零旋鈕,使得數(shù)字顯示為零,然后將被測樣品移入光路,顯示值即為被測樣品的吸光度值。 
四、 濃度c的測量 
將選擇開關(guān)由“A”旋至“C”將已標定濃度的樣品放入光路,調(diào)節(jié)濃度旋鈕,使得數(shù)字顯示為標定值,將被測樣品放入光路即可讀出被測樣品的濃度值。 
五、注意事項 
1、測量完畢,速將暗盒蓋打開,關(guān)閉電源開關(guān),將靈敏度旋鈕調(diào)至最低檔,取出比色皿,將裝有硅膠的干燥劑袋放入暗盒內(nèi),關(guān)上蓋子,將比色皿中的溶液倒入燒杯中,用蒸餾水洗凈后放回比色皿盒內(nèi)。 
2、每臺儀器所配套的比色皿不可與其它儀器上的表面皿單個調(diào)換。 

 


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