一．背景
近年來(lái), 微量元素以其巨大的生物學(xué)作用、生理功能及臨床診療的實(shí)用價(jià)值引起了人們對(duì)中成藥中無(wú)機(jī)元素尤其是微量元素的研究興趣�，F(xiàn)代研究表明, 在中成藥藥效發(fā)揮過(guò)程中, 微量元素的協(xié)同作用不可忽視, 適量的微量元素不僅可以促進(jìn)機(jī)體的生長(zhǎng)發(fā)育, 而且還可以提高機(jī)體的免疫功能, 降低人類(lèi)對(duì)疾病的易感性。
二．微量元素的測(cè)定
微量元素的測(cè)定可為闡明中藥的作用機(jī)理、改造和新藥的創(chuàng)新提供基礎(chǔ)數(shù)據(jù), 也能為中藥材的鑒定和改進(jìn)提供依據(jù)。
原子吸收光譜法具有靈敏度高、選擇性好、精密度高、分析速度快等優(yōu)點(diǎn)。利用原子吸收光譜法首次測(cè)定了老年咳喘片、復(fù)方半夏片、胃痛寧片、拳參片、參芪降糖膠囊、夏桑菊顆粒和美國(guó)洋參含片7種中成藥中Ca , Mg , Fe , Zn ,K, Na , Mn , Cu , Cr , Co ,Sr , Ni , Cd 和Pb 元素的含量。詳細(xì)研究了消化液(混酸) 種類(lèi)、混酸溶液中HNO3 和HClO4的比例、消化液體積及消化時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。
三．應(yīng)用方案說(shuō)明
1.儀器
原子吸收分光光度計(jì),電熱干燥箱，14種元素空心陰極燈，電子分析天平，燒杯等。
2 .試劑及標(biāo)準(zhǔn)溶液
14種元素(Ca , Mg , Fe , Zn ,K, Na , Mn , Cu , Cr , Co ,Sr , Ni , Cd , Pb) 的標(biāo)準(zhǔn)溶液均購(gòu)自國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心(儲(chǔ)備液的濃度除Cr 為1 000μg/mL外, 其余元素均為100μg/mL) 。HNO3, HClO4,H2SO4,HCl,H2O2。實(shí)驗(yàn)用水為超純水。
3 .樣品來(lái)源及處理
實(shí)驗(yàn)所用的7種中成藥老年咳喘片、復(fù)方半夏片、胃痛寧片、拳參片、參芪降糖膠囊、夏桑菊顆粒、美國(guó)洋參含片均為市售。
樣品溶液的制備: 取適量的藥品(丸劑用研缽預(yù)先研碎,膠囊則使用囊內(nèi)顆粒)置于電熱干燥箱中,在100℃下烘干1h ,冷卻后置于干燥器中。準(zhǔn)確稱(chēng)取1g 左右的藥品于100mL 的小燒杯中,加入20 mL HNO3-HClO4(3∶1)混酸后加熱消化40 min , 定量轉(zhuǎn)移并定容至100mL 。取上層清液進(jìn)行測(cè)定(必要時(shí)進(jìn)行適當(dāng)稀釋) 。
4.混酸種類(lèi)的選擇
為找出適宜的消化體系, 研究了HNO3-HClO4 ,HNO3-HCl , HNO3-H2SO4 和HNO3-H2O2 幾種消化體系對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明: 采用HNO3-HClO4 混酸體系作消化液比較合適。
HNO3-HClO4 混酸中HNO3 和>HClO4 體積比的影響以拳參片中Cu ,Fe , Zn , Mn 和Ni 的含量測(cè)定為例, 研究了混酸消化液中HNO3 和HClO4 體積比分別為1∶1 , 3∶1 ,4∶1 , 5∶1 , 7∶1 , 9∶1 的影響�？梢�(jiàn), HNO3-HClO4體積比為3∶1 時(shí)消化效果較好。
5.消化時(shí)間的影響
仍以Cu , Fe , Zn , Mn 和Ni 的含量測(cè)定為例, 使用體積比為3∶1 的HNO3-HClO4 混酸作為消化體系, 固定混酸體積為15mL , 研究了消化時(shí)間對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響。結(jié)果表明, 40min 的消化時(shí)間即可達(dá)到最佳消化效果。
6.消化液體積的影響
以3∶1 的HNO3-HClO4 混酸體系為消化液并固定消化時(shí)間為40min、稱(chēng)樣質(zhì)量為1.0g , 研究了混酸體積分別為8 ,12 , 16 , 20 , 24mL 時(shí)對(duì)測(cè)定結(jié)果的影響(仍以拳參片中Cu ,Fe , Zn , Mn和Ni 的含量測(cè)定為例) 。可見(jiàn), 混酸體積為20mL 即可獲得滿意的測(cè)定結(jié)果。
7.標(biāo)準(zhǔn)曲線及方法準(zhǔn)確度試驗(yàn)
將14種元素的儲(chǔ)備液稀釋成濃度適宜的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液,采用六標(biāo)準(zhǔn)定標(biāo)準(zhǔn)曲線法, 按表1 所列儀器條件進(jìn)行測(cè)定。結(jié)果表明, 14 種元素的工作曲線均為直線,且相關(guān)系數(shù)均大于0.997 , 表明工作曲線的線性關(guān)系良好。為了進(jìn)一步考察方法的準(zhǔn)確性, 以拳參片為例作了加標(biāo)回收率試驗(yàn)(為保證準(zhǔn)確度, 加標(biāo)回收率試驗(yàn)平行做3份, 每份平行測(cè)定3次,然后取平均值)。
8.靈敏度和檢出限
按文獻(xiàn)計(jì)算出方法的靈敏度和檢出限。
9.樣品中14 種微量元素的測(cè)定
準(zhǔn)確稱(chēng)量1.0 g 的樣品, 按1.3 節(jié)中樣品處理方法處理樣品。按所列儀器工作條件對(duì)樣品溶液進(jìn)行測(cè)定。
四．方案結(jié)果說(shuō)明
從測(cè)定結(jié)果可以看出, 所選7 種中成藥中Ca , Mg , Fe ,K和Na 五種元素的含量普遍比較豐富。但隨著品種和功能主治作用的不同, 各藥物中微量元素的含量也大不一樣。如治療糖尿病類(lèi)藥物中Mn 含量較高。胃痛片中含有較高的Sr, Mn 和Cu 元素等。
同時(shí), 對(duì)人體有害的Cd和Pb 在某些藥物中也有一定濃度，應(yīng)引起關(guān)注。
